1. CCK-8 的培养时辰般为 1-4 小时,但在培养 30 分钟傍边即可取出肉眼不雅察显进度,左证细胞种类而定,需要摸索要求,CCK-8 的佳响适时辰以具体显的佳时辰为准。 2. 使用 96 孔板进行检测时,淌若细胞培养时辰较长承德管道保温施工队,定要紧密蒸提问题。面,由于 96 孔板周围圈容易挥发,不错领受弃用周围圈的目的,改加雷同量的 PBS 、水或培养液;另面,不错把 96 孔板置于皆集培养箱内水源的地,以缓解挥发。 3. 本试剂盒的检测依赖于脱氢酶催化的响应,是以剂 (举例些抗氧化剂) 会侵犯检测,淌若待检测体系中存在较多的剂,需设法去除。用酶标仪检测前需确保每个孔内莫得气泡,不然会侵犯测定。 4. 加入药物中如含有金属,铁皮保温施工对 CCK-8 显有影响。终浓度为 1 mM 的氯化亚铅、氯化铁、硫酸铜会阻止 5 、15 、90 的显响应,使智谋度镌汰。淌若终浓度是 10 mM 的话,将会 阻止。 5. 培养基中的酚红不会影响履行成果,酚红的吸光度不错在野心时,通过扣除空缺孔中本底的吸光度而消去,因此不会对检测酿成影响。 6. 本居品不错检测,但不可检测酵母细胞。向 100 μL 培养液中加入 10 μL CCK-8 溶液,并培养 1-4 小时或过夜。 7. CCK-8 试剂对细胞的毒稀奇低。它和活细胞内的脱氢酶执续响应使溶液颜握住加,OD 值握住增多 (注: 活细胞内的脱氢酶是执续产生的) 。 8. 要测定细胞的具体数目,淡薄同期作念范例弧线。 9. 淡薄领受多通说念移液器,以减小平行孔间的互异。 10. 以下法不错间隔 CCK-8 响应 (96 孔板) : (a). 在显响应后,将培养板扬弃 4°C 雪柜内。(b). 每孔加 10 μL 0.1 M HCl 溶液。(c). 每孔加 10 μL 1 (w/v) 的 SDS (十二烷基硫酸钠) 溶液。 紧密:响应罢手后,应在 24 小时内测定。 11. 本居品仅限于业东说念主员的科学征询用,不得用于临床会诊或疗,不得用于食物或药品。 12. 为了您的安全和健康,请穿履行服并戴次手套操作。
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